D2.4 步骤
D2.4.1 标准曲线的制作
D2.4.1.1 取标准液25mL，加蒸馏水稀释至1000mL，此液浓度为0.00025M，即每毫升含对苯二酚0.25μmol（甲液）。
D2.4.1.2 取甲液25mL用蒸馏水稀释至250mL，此溶液浓度为0.000025M，即每毫升含对苯二酚0.25 μmol（乙液）。
D2.4.1.3 取6个50mL容量瓶，分别加入标准稀释液（乙液）0；0.1；0.2；0.3；0.4；0.5 μmol对苯二酚（即4.0；8.0；12.0；16.0；20.0mL乙液），加入适量蒸馏水，使各容量瓶中大约为20mL溶液。
D2.4.1.4 用刻度吸管加入1：1磷酸2mL。
D2.4.1.5 用吸管取饱和氯化钠溶液5mL。
D2.4.1.6 用吸管取0.1N溴酸钾-溴化钾溶液2mL，尽可能不要沾在瓶壁上。用极少量的水冲洗瓶壁并摇匀。溶液应是氯溴的浅黄色。放入35℃恒温水浴锅内，放置15min。
D2.4.1.7 吸取20%溴化钾溶液2mL，沿瓶壁周围加入容量瓶中。摇匀后放在35℃水浴锅中5～10min。
D2.4.1.8 用滴管快速加入5%苯酚溶液1mL，立即摇匀，使溴的颜色退去。（如慢慢加入则易生成白色沉淀，无法比色）。
D2.4.1.9 降温：放自来水中降温3min。
D2.4.1.10 用吸管加入新配制的5%碘化钾溶液2mL，冲洗瓶壁；放入暗柜5min。
D2.4.1.11 吸取0.2%淀粉指标剂10mL，加入容量瓶中，用蒸馏水加至刻度，加盖摇匀后，放暗柜中20min。
D2.4.1.12 将发色试液分别放入2cm比色槽中，在分光光度计570nm处，以试剂空白为零，分别测出5个溶液的光密度，并绘制出标准曲线。横坐标为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μmo/50mL。
D2.4.2 水样的测定
取水样适量（约1～10mL）放入50mL容量瓶中，并加蒸馏水至20mL左右，于另一个50mL容量瓶中加20mL蒸馏水作试剂空白。以下按步骤D2.4.1.11 ～D2.4.1.12进行，测出水样的光密度，在曲线上查出50mL中所含微克分子数。
D2.4.3需排除干扰的水样测定
当水样中含有六价铬离子而影响测定时，可用NaNO2将Cr6+还原成Cr3+，用过量的尿素去除多余的NaNO2对本实验的干扰，即可达到消除铬干扰的目的。
准确取适量的水样（约1～10mL），放入50mL容量瓶中，加入蒸馏水至20mL左右，加入1：1磷酸2mL，再加入3滴10％NaNO2，充分振荡，放入35℃恒温水浴中15min。再加入20％尿素2mL，充分振荡，放入35℃水浴锅中10min。以下操作按步骤D2.4.1.5～D2.4.1.12进行，测出光密度，在曲线上查出50mL中所含微克分子数。
D2.5 计算水样中显影剂及氧化物总量C（以对苯二酚计）按式（D2）计算：
D2.6 注意事项
D2.6.1 本试验步骤多，时间长，因此要求操作仔细认真。
D2.6.2 所用玻璃器皿必须用清洁液洗净。
D2.6.3 水浴温度要准确在35℃±1℃,每个步骤反应时间要准确控制。
D2.6.4 加入溴酸钾-溴化钾后，必须用蒸留水冲洗容量瓶壁，否则残留溴酸钾与碘化钾作用生成碘，使光密度增加。
D2.6.5 在无铬离子的废水中，水样可不必处理，直接进行测定。
D2.6.6 水样如太浓，则预先稀释再进行测定。 D3 元素磷的测定——磷钼蓝比色法
D3.1 原理
元素磷经苯萃取后氧化形成的钼磷为氯化亚锡还原成蓝色铬合物。灵敏度比钒钼磷酸比色法高，并且易于富集，富集后能提高元素磷含量小于0.1mg/L时检测的可靠性，并减少干扰。
水样中含砷化物、硅化物和硫公物的量分别为元素磷含量的100倍、200倍、和300倍时，对本方法无明显干扰。
D3.2 仪器和试剂
D3.2.1 仪器：分光光度计：3cm比色皿。
D3.2.2 比色管：50mL。
D3.2.3 分液漏斗瓶：60、125、250mL。
D3.2.4 磨口锥形瓶：250mL。
D3.2.5 试剂：以下试剂均为分析纯：苯、高氯酸、溴酸钾、溴化钾、甘油、氯化亚锡、钼酸铵、磷酸二氢钾、乙酸丁酯、硫酸、硝酸、无水乙醇、酚酞指示剂。
D3.3 溶液的配制
D3.3.2 溴酸钾-溴化钾溶液：溶解10g溴酸钾和8g溴化钾于400mL水中。
D3.3.3 2.5%钼酸铵溶液：称取2.5g钼酸铵，加1：1硫酸溶液70mL，待钼酸铵溶解后再加入30mL水。
D3.3.4 2.5%氯化亚锡甘油溶液：溶解2.5g氯化亚锡于100mL甘油中（可在水浴锅中加热，促进溶解）。
D3.3.5 5%钼酸铵溶液：溶解12.5g钼酸铵于150mL水中，溶解后将此液缓慢地倒入100mL1：5的硝酸溶液中。
D3.3.6 1%氯化亚锡溶液：溶解1g氯化亚锡于15mL盐酸中，加入85mL水及1.5g抗坏血酸（可保存4～5天）。
D3.3.7 1:1硫酸溶液、1:5硝酸溶液、20%氢氧化钠溶液。
D3.4 测定步骤
D3.4.1 废水中元素磷含量大于0.05mg/L时，采取水相直接比色，按下列规定操作。
D3.4.1.1 水样预处理
a）萃取：移取10～100mL水样于盛有25mL苯的125mL或250mL的分液漏斗中，振荡5min后静置分层。将水相移入另一盛有15mL苯的分液漏斗中，振荡2min后静置，弃去水相，将苯相并入第一支分液漏斗中。加入15mL水，振荡1min后静置，弃去水相，苯相重复操作水洗6次。
b）氧化：在苯相中加入10～15mL溴酸钾-溴化钾溶液，2 mL1：1硫酸溶液振荡5min，静置2min后加入2mL高氯酸，再振荡5min，移入250mL锥形瓶内，在电热板上缓缓加热以驱赶过量高氯酸和除溴（勿使样品溅出或蒸干），至白烟减少时，取下冷却。加入少量水及1滴酚酞指示剂，用20%氢氧化钠溶液中和至呈粉红色，加1滴1：1硫酸溶液至粉红色消失，移入容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度（据元素磷的含量确定稀释体积）。
D3.4.1.2 比色
移取适量上述的稀释液于50mL比色管中，加2mL2.5%钼酸铵溶液及6滴2.5%氯化亚锡甘油溶液，加水稀释至刻度，混匀，于20～30℃放置20～30min，倾入3cm比色皿中，在分光光度计690nm波长处，以试剂空白为零，测光密度。
D3.4.1.3 直接比色工作曲线的绘制 D3.4.2 废水中元素磷含量小于0.05mg/L时，采用有机相萃取比色。按下列规定操作：
D3.4.2.1 水样预处理
萃取比色：移取适量的氧化稀释液于60mL分液漏斗已含有3mL的1：5硝酸溶液中，加入7mL15%钼酸铵溶液和10mL乙酸丁酯，振荡1min，弃去水相，向有机相加2mL1%氯化亚锡溶液，摇匀，再加入1mL无水乙醇，轻轻转动分液漏斗，使水珠下降，放尽水相，将有机相倾入3cm比色皿中，在分光光度计630或720nm波长处，以试剂空白为零测光密度。
D3.4.2.2 有机相萃取比色工作曲线的绘制
D3.5 计算
用式（D3）计算直接比色和有机相萃取比色测得1L废水中元素磷的毫克数。
式中：G——从工作曲线查得元素磷量，μg；
V1——取废水水样体积，mL；
V 2——废水水样氧化后稀释体积，mL；
V3——比色时取稀释液体积，mL；
D3.6 精确度
平行测定两个结果的差数，不应超过较小结果的10%。
取平行测定两个结果的算术平均值作为样品中元素磷的含量，测定结果取两位有效数字。
D3.7 样品保存
采样后调节水样pH值为6～7，可于塑料瓶或玻璃瓶贮存48h。
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